微生物室實(shí)習(xí)總結(jié)范例
前言：病原微生物感染引起發(fā)病，院內(nèi)感染不斷增加。細(xì)菌由于人類不斷婪用抗菌藥物，耐藥性不斷增加，這些都嚴(yán)重危害人類健康。病原微生物在實(shí)驗(yàn)室潛在對實(shí)驗(yàn)室人員的威脅也日趨嚴(yán)峻。生物安全的宣教必不可少，怎樣把只有基本微生物知識的學(xué)生，與臨床實(shí)驗(yàn)室大量面對病人標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接種、培養(yǎng)、觀察、鑒定、藥敏、報(bào)告等各個(gè)環(huán)節(jié)的實(shí)踐結(jié)合起來，由基礎(chǔ)知識向?qū)I(yè)技能有效轉(zhuǎn)化，把基礎(chǔ)理論知識在實(shí)習(xí)中有效發(fā)揮，與實(shí)踐相結(jié)合使之升華，是培養(yǎng)合格檢驗(yàn)人才的關(guān)鍵。現(xiàn)就微生物室的實(shí)習(xí)帶教體會總結(jié)如下。
1、重視標(biāo)本送檢前的質(zhì)量控制。
微生物實(shí)驗(yàn)室每天都收到來自病房，門診病人送檢的大量標(biāo)本，有痰、中段尿、傷口分泌物、生殖道拭子、血培養(yǎng)、膿液、術(shù)中臨時(shí)所采集的標(biāo)本等等。標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和處理是否得當(dāng)及時(shí)對試驗(yàn)結(jié)論有直接影響。是分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，只有讓學(xué)生全面認(rèn)識標(biāo)本采集與處理的全過程及影響因素，才能確保檢驗(yàn)結(jié)論的準(zhǔn)確性、有效性。
1.1標(biāo)本的采集
例如中段尿的采集，應(yīng)告知學(xué)生尿道內(nèi)是人體無菌的腔道，尿道外則是有菌的部位。所以采集中段尿時(shí)必須對外陰進(jìn)行徹底消毒，排出前一段尿液，以便沖洗外尿道或外陰，留取中段尿于無菌杯中送檢。如痰標(biāo)本的采集，應(yīng)囑病人于清晨嗽洗口腔，咳出深部的痰液于無菌杯中送檢，如是支原體和衣原體的檢測，則應(yīng)留取女性宮頸拭子或男性尿道拭子，因?yàn)橹гw和衣原體都只寄生在宮頸或者尿道的柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)。
1.2標(biāo)本的處理
學(xué)生應(yīng)知道，標(biāo)本的及時(shí)處理接種對微生物的成活率至關(guān)重要，例如淋病奈瑟氏菌，需要保溫，保濕送檢，提倡床邊接種，培養(yǎng)基應(yīng)先預(yù)溫，接種后放36℃溫箱、5%co2環(huán)境，保濕培養(yǎng)。又如痰標(biāo)本應(yīng)接種在血平板，巧克力平板，沙基，嗜血流感巧克力平板上，血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標(biāo)本里的基礎(chǔ)菌群的生長狀態(tài)。沙基主要觀察是否有念珠菌生長，嗜血流感巧克力平板主要是觀察是否有嗜血流感桿菌屬的生長，此平板在配制時(shí)加入了針對性抗菌藥物，能夠抑制革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌的生長，只適合于嗜血桿菌屬的生長。學(xué)生應(yīng)學(xué)會每一份標(biāo)本，接種到相應(yīng)有用、有目的、有選擇的培養(yǎng)基中。
2、注重特征、綜合分析
細(xì)菌的鑒定是運(yùn)用所學(xué)知識，綜合性判斷的過程。它需要根據(jù)病人基本信息，標(biāo)本來源、診斷、平板上形態(tài)特征，生長情況，氧化酶、觸酶陰陽性狀、革蘭氏染色鏡下形態(tài)，生化反應(yīng)，藥敏結(jié)果等進(jìn)行綜合性判斷，最終得出鑒定結(jié)果。我們在帶教過程中應(yīng)根據(jù)以上信息，逐項(xiàng)分析，深入淺出，理論聯(lián)系實(shí)際，把學(xué)生在課堂中所學(xué)知識調(diào)動出來，溫故知新，對病人標(biāo)本的狀況加以充分闡述，循序漸進(jìn)，循循誘導(dǎo)。加深學(xué)生在視覺、聽覺、嗅覺的印象。例如革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌在血平板，巧克力平板是有區(qū)別的。革蘭氏陰性桿菌在平板上菌落直徑較大，約3-5mm，突起、圓形，濕潤、有光澤感，我把它比作面包。革蘭氏陽性球菌，在平板以上菌落直徑較小，約2-3mm，較前者小、圓形、濕潤。有光澤感，但不如前者，貼平板生長，我把它比作餅。一包一餅就簡單易記地把革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌區(qū)分開來。使細(xì)菌菌落生活化，形象化，易于記憶。如銅綠假單胞在平板上菌落邊緣不整齊，有綠色素，菌落邊緣向外延長，培養(yǎng)時(shí)間越長菌落越大，有特殊的芳香氣味。學(xué)生通過芳香氣味等以上特征，進(jìn)一步識認(rèn)了銅綠假單胞菌。在常見的病人標(biāo)本中，所檢出的細(xì)菌菌落都具固有的`特征和性狀，就像人與人之間通過性格，特征就能區(qū)分開來。我們也應(yīng)該把各種細(xì)菌在平板上的菌落特征加以描述，學(xué)生就較易接受學(xué)懂。
3、培養(yǎng)學(xué)生自學(xué)能力和動手能力。
專科和本科的學(xué)生在微生物室的實(shí)習(xí)時(shí)間大約有八至九周。在第一周，會安排學(xué)習(xí)培養(yǎng)基的制備，在此期間學(xué)習(xí)微生物室常用培養(yǎng)基的制備，如巧克力平板、SS平板、麥康凱平板、藥敏平板、營養(yǎng)瓊脂平板、淋基平板、肉湯管、雙糖管、TCBS平板、4號瓊脂平板等的制備過程。帶教老師將邊帶邊放手讓學(xué)生自己做一些基本的操作，如消毒平板、配制培養(yǎng)基，天平稱量，復(fù)溶瓊脂加血，倒平板等基本功的操作。第二周學(xué)習(xí)梅毒初篩，確證試驗(yàn)和血清學(xué)的一些試驗(yàn)，也將學(xué)習(xí)衣原體、支原體的檢測方法。第三到九周將學(xué)習(xí)細(xì)菌的鑒定。用一至兩周時(shí)間學(xué)習(xí)各類標(biāo)本的接種，平板的選擇，平板分區(qū)劃線，熟練掌握接種的流程。第五周開始學(xué)習(xí)各類細(xì)菌的生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。帶教老師應(yīng)結(jié)合平板上菌落形態(tài)。鏡下革蘭氏染色結(jié)果，各類平板上生長情況，病人的基本資料，診斷，本標(biāo)來源等基本信息分析評述給學(xué)生聽，逐步推論出細(xì)菌的大致方向，正確引導(dǎo)學(xué)生的思路。學(xué)生在每天應(yīng)對比較常見而且較有意義的細(xì)菌進(jìn)行鑒定，做生化反應(yīng)及藥敏試驗(yàn)，通過四周自己動手操作，能對臨床上常見的細(xì)菌有一定的認(rèn)識，能把菌鑒定到種。通過實(shí)踐提高學(xué)生的動手能力，熟練掌握細(xì)菌室的基本操作技能。深化理論知識，使到理論與實(shí)踐融會貫通。提倡學(xué)生多提問，有疑問老師及時(shí)解答與學(xué)生的學(xué)習(xí)相動。
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