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      臨床微生物檢驗(yàn)之病原性真菌檢驗(yàn)

      時(shí)間:2024-06-05 13:40:12 檢驗(yàn)技師/士 我要投稿
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      臨床微生物檢驗(yàn)之病原性真菌檢驗(yàn)

        真菌是一大類不含葉綠素,無根、莖、葉,由單細(xì)胞或多細(xì)胞組成的真核細(xì)胞型微生物。大部分真菌對(duì)人類有益,能引起人類疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是yjbys小編為大家?guī)淼呐R床微生物檢驗(yàn)之病原性真菌檢驗(yàn)的知識(shí),歡迎閱讀。

      臨床微生物檢驗(yàn)之病原性真菌檢驗(yàn)

        一、常見單細(xì)胞真菌的形態(tài)觀察

        1、新型隱球菌墨汁負(fù)染色片:可見菌體呈球形,大小不一,有很厚的莢膜,包圍在菌體周圍,透明發(fā)亮,并可見發(fā)芽的菌體。

        2、白色念珠菌菌體形態(tài):用患者的棉拭子標(biāo)本常法涂片,革蘭氏染色,鏡檢。顯微鏡下可見菌體呈卵圓形,較葡萄球菌大2-5倍,細(xì)胞出芽伸長(zhǎng)而成假菌絲,在假菌絲生長(zhǎng)點(diǎn)上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長(zhǎng)的大而圓的厚膜孢子。

        二、皮膚絲狀菌的檢查

        材料:

        病人的甲屑、皮屑或毛發(fā)、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學(xué)顯微鏡等。

        方法:

        1、采標(biāo)本:用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑,甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。

        2、制片:用小鑷子取少許皮(甲)屑標(biāo)本置于載玻片中央,滴1-2滴10%KOH溶液,覆加一蓋玻片,在火焰上緩慢加熱,以加速角質(zhì)溶解,使標(biāo)本透明,然后輕輕加壓使成薄片,驅(qū)走氣泡并吸去周圍溢液。

        3、鏡檢:先用低倍鏡觀察有無真菌菌絲或孢子,再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的特征。鏡檢時(shí)光線應(yīng)稍弱,使視野稍暗。陽性標(biāo)本常可查見分支菌絲或孢子。

        三、真菌的培養(yǎng)

        材料:

        菌種、沙保氏培養(yǎng)基、平皿、載玻片、蓋玻片。

        方法:

        1、一般培養(yǎng):分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種于沙保氏培養(yǎng)基,于22℃-28℃下培養(yǎng)(深部真菌可培養(yǎng)于37℃環(huán)境),一周后觀察菌落特征。真菌菌落在形態(tài)上可分為三大類:

        酵母型菌落:與細(xì)菌菌落相似,圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤(rùn)。

        類酵母型菌落:同酵母型菌落,圓形、較大、白色,但菌落根部有假菌絲長(zhǎng)入培養(yǎng)基內(nèi)。

        絲狀菌落:是多細(xì)胞真菌的菌落形式。有許多疏松的菌絲體構(gòu)成,菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀,菌落中央有皺折,外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。

        2、小培養(yǎng)(玻片法):在無菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂,待凝固后,無菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊,再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上,然后在小塊培養(yǎng)基四邊接種已分純的真菌菌種,蓋上無菌蓋玻片,移入有一定濕度的無菌平皿內(nèi),置22℃-28℃孵育。動(dòng)態(tài)觀察生長(zhǎng)過程,根據(jù)菌絲和孢子的特點(diǎn)鑒定真菌類別。

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