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臨床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)
臨床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)有哪些你知道嗎?下面是yjbys小編為大家?guī)淼呐R床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)的知識(shí)，歡迎閱讀。
一、免疫標(biāo)記技術(shù)：2種分類
1.(1) 免疫組化技術(shù)(immunohistochemical technique): 用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原抗體的定位(2)免疫測(cè)定(immunoassay): 用于液體標(biāo)本中抗原或抗體的測(cè)定.
2.(1) 免疫熒光技術(shù) (2) 酶免疫技術(shù) (3) 放射免疫技術(shù)(4) 金標(biāo)技術(shù)(5)化學(xué)發(fā)光技術(shù)
酶免疫技術(shù)—固相酶免疫技術(shù)―酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)
ELISA方法類型與操作步驟
雙抗體夾心法：檢測(cè)抗原最常用的方法
原理(操作步驟)： (1) 特異性抗體包被載體形成固相抗體. (2) 洗去未結(jié)合的抗體和雜質(zhì). (3) 加入待測(cè)樣品，使其中相應(yīng)抗原和固相抗體呈特異性結(jié)合成復(fù)合物. (4) 再洗滌除去未結(jié)合的物質(zhì).(5) 加酶標(biāo)抗體，使之與固相上的抗原呈特異性結(jié)合.(6) 經(jīng)充分洗滌后除去未結(jié)合的游離酶標(biāo)記抗體.(7) 加入相應(yīng)酶的底物，固相化的酶催化底物變成有色產(chǎn)物，顏色反應(yīng)的程
度與固相上抗原的量有關(guān).
適用范圍：檢測(cè)抗原的最常用方法 ,用此方法檢測(cè)的抗原，應(yīng)至少有2個(gè)以上結(jié)合位點(diǎn)，故不能用以測(cè)定半抗原物質(zhì)。
2、競爭法：(可用于測(cè)定抗原或抗體)
原理(操作步驟)：以測(cè)定抗原為例(1) 將特異性抗體包被載體，使形成固相抗體,(2) 洗去雜質(zhì)，待測(cè)孔中同時(shí)加待測(cè)標(biāo)本和酶標(biāo)記抗原，使之與固相抗體反應(yīng)。如待測(cè)標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)記抗原共同競爭結(jié)合固相抗體。待測(cè)標(biāo)本中抗原量越多，酶標(biāo)記抗原結(jié)合量越少(3) 洗滌除去游離酶標(biāo)記物后，加底物顯色(4) 結(jié)果是不含受檢抗原的對(duì)照孔，其結(jié)合的酶標(biāo)記抗原最多，顯色最深。對(duì)照孔與待測(cè)孔顏色深度之差代表受檢標(biāo)本中的抗原量。待測(cè)孔越淡, 標(biāo)本中抗原量越多。
3、間接法：(可檢測(cè)各種相應(yīng)抗體)
原理(操作步驟)：(1) 將特異性抗原包被載體，使形成固相抗原; (2) 洗去未結(jié)合的物質(zhì),加入待測(cè)樣品，使其中待測(cè)的特異性抗體與固相抗原相結(jié)合形成固相抗原抗原復(fù)合物;(4)再經(jīng)洗滌后，固相上僅留下特異性抗體; (5) 加酶標(biāo)抗人球蛋白(酶標(biāo)抗抗體)，使與固相復(fù)合物中抗體結(jié)合，從而使待測(cè)抗體間接標(biāo)記上酶;(6) 洗滌除去多余的酶標(biāo)抗體，固相結(jié)合酶量就代表待測(cè)抗體的量; (7) 最后加入底物顯色，其顏色深淺可代表待測(cè)抗體量。
免疫熒光法---抗核抗體的檢測(cè)
二、沉淀反應(yīng)
可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合所出現(xiàn)的反應(yīng)。反應(yīng)分為兩個(gè)階段:(1) 抗原抗體特異性結(jié)合;(2) 形成可見的免疫復(fù)合物。
三、凝集反應(yīng)
細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，出現(xiàn)肉眼可見的凝集(agglutination)現(xiàn)象。
凝集反應(yīng)的發(fā)生分為兩個(gè)階段：(1)抗原抗體的特異結(jié)合;(2)出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。
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